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GDRC的基因突变体是如何制作的？

发布日期： 2026-03-16     浏览量：272

  我们利用CRISPR/Cas9系统制作果蝇基因突变体，大致分为三个主要步骤：设计构建gRNA表达质粒，遗传杂交产生突变，鉴定突变并建立品系。具体而言，1）通过软件为每个待敲除基因选择一个Cas9靶序列，构建至U6启动子的表达质粒；2）显微注射，获得gRNA转基因果蝇品系。将gRNA转基因果蝇与nos-Cas9工具果蝇品系杂交，后代中产生目的基因突变体；3）通过PCR并测序，选择在目的基因编码区产生移码的突变体建立稳定品系并保种。
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